当归补血汤
《内外伤辨惑论》卷中
【异名】黄芪当归汤(《兰室秘藏》卷上)、补血汤(《脉因症治》卷上)、芪归汤(《周慎斋遗书》卷五)、黄芪补血汤(《产科心法》下集)。
【组成】黄芪一两(30g) 当归(酒洗)(6g)
【用法】上㕮咀。以水二盏,煎至一盏,去滓,空腹时温服。
【功用】补气生血。
【主治】血虚发热证。肌热面赤,烦渴欲饮,舌淡,脉洪大而虚,重按无力。亦治妇人经期、产后血虚发热头痛,或疮疡溃后,久不愈合者。
【病机分析】血为气之母,运载阳气以行全身,故《医原》说:“血能载气以行也”。若劳倦内伤,阴血耗损,阳气无所依附,必致漂浮行散而无所归,《读医随笔》说:“所谓血藏气者,气之性情慓悍滑疾,行而不止,散而不聚者也。若无以藏之,不竟行而竟散乎?惟血之质为气所恋,因以血为气之室,而相裹结不散矣”,唐宗海亦说:“血虚者,发热汗出,以血不配气,则气盛而外泄也”(《血证论》卷6)。本证因血虚阴不维阳,阳气浮越于外,而出现肌热面赤,烦渴欲饮,发热头痛,脉象洪大等类似白虎汤证之象,但其脉虽洪大却重按无力,故为真虚假实之证。可见此时辨别虚实证候的关键在于脉象的虚实,正如李杲所云:“血虚发热,证象白虎,惟脉不长实有辨耳,误服白虎汤必死”(《内外伤辨惑论》卷中)。
【配伍意义】本方是为血虚阳浮之虚热证而设,是证虽以阴血亏虚为本,阳浮发热为标,但有形之血不能速生,而外浮之阳气若不及时挽回则恐有散亡之虞!故治疗当遵“急则治标”之训,力挽其浮越之阳气,留得一分阳气,便有一分生机,俟阳气渐回,虚热渐退,再缓图其本。方中黄芪甘温纯阳,功擅补气固表,本方重用该药,意在取其量大力宏,以急固行将散亡之阳气,浮阳若得挽回,则诸危殆之候可缓,此即“有形之血不能速生,无形之气所当急固”之理,且其补气亦助生血之功,使阳生阴长,气旺血充,故本方以之为君。配以少量当归养血和营,补虚治本为臣,再得黄芪生血之助,使阴血渐充,阳气渐可潜涵,则虚热自退。正如张秉成所论:“如果大脱血之后而见此等脉证,不特阴血告匮,而阳气亦欲散亡。斯时也,有形之血不能速生,无形之气所当急固。故以黄芪大补肺脾元气而能固外者为君。盖此时阳气已去里而越表,恐一时固里无及,不得不从卫外以挽留之。当归益血和营,两味合之,便能阳生阴长,……非区区补血滋腻之药,所可同日语也”(《成方便读》卷1)。
本方配伍特点在于以大剂补气之药配伍少量补血之品,重在益气固表以治阳浮之标,并可冀补气生血之力以复血虚之本,故尤宜于血虚阳浮发热之证。
【临床运用】
1.证治要点 本方是为血虚发热证立法,临床运用时除肌热,口渴喜热饮,面红外,应以舌淡,脉大而虚,重按无力为使用要点。
2.加减法 血虚证而无阳浮发热者,黄芪之量宜减;气不摄血之出血证,可加仙鹤草、血余炭等以加强止血之力。
3.本方现代常用于治疗妇人经期、产后血虚发热等属血虚阳浮证者,以及各种贫血、过敏性紫癜、妇人月经过多,以及疮疡久溃不愈等辨证属血虚气弱或气不摄血者。
【使用注意】阴虚潮热者,慎用本方。
【源流发展】本方为金代医家李杲所制,是治疗血虚发热证的代表方剂。经考李氏医书中有关本方主治证的论述主要有三处,即《内外伤辨惑论》卷中之“肌热燥热,困渴引饮,目赤面红,昼夜不息,其脉洪大而虚,重按全无。……血虚发热,证象白虎,惟脉不长实有辨耳,误服白虎汤必死。此病得之于饥困劳役”;《脾胃论》卷中之“发热恶热,烦躁,大渴不止,肌热不欲近衣,其脉洪大,按之无力者,或兼目痛鼻干者,……此血虚发燥”;以及《兰室秘藏》卷上所云之“热上攻头目,沿身胸背发热”等。以上论述虽然见载于不同著作,但其症状描述均有“发热,烦渴,肌热,恶热”等内热炽盛之象,因其热缘于血虚,而被称之“血虚发热”或“血虚发燥”,是证“得之于饥困劳役”,故属内伤发热之虚热证。由此可知,李氏当归补血汤实为血虚发热证而制,故方中重用甘温之黄芪大补元气,力挽浮阳,伍以当归养血补虚,从而使浮阳内潜,阴血渐充而诸证得痊,亦属“甘温除热”之法。本方对于后世血虚发热证候的治疗影响深远,历代医家不仅用药悉宗本方,而且芪、归之量比亦皆从东垣之制。古今医家还根据本方的药物配伍作用而将其用于多种气血虚弱病证的治疗。如因黄芪尚有益气摄血和益气托毒等作用,故以本方治疗气血亏虚,疮疡内陷不起或久不收口者(《证治准绳·疡医》卷2)以及气不摄血的出血证(《血证论》卷7),方中用药比例仍遵原方;又因本方由补气合补血之品组成,故以其治疗多种血虚证及气血两虚证,但宜减原方中黄芪之量,如《寿世保元》卷7载本方治疗妇人素禀虚弱,加之生产时血亏气耗,产后无乳者,将归、芪之量比改为1∶2;略早于本方的用治“妇人气虚血少,经水三月一来”的当归补血汤(《陈素庵妇科补解》卷1),方中黄芪之量竟少于当归(当归一两二钱、炙黄芪一两),由于上述方剂是为血虚或气血两虚无阳气浮越发热者而设,故剂量有此变化。近年有人通过对不同比例的黄芪与当归配伍作用的实验研究发现,归、芪之量在2∶1时养血作用最为明显,指出原方比例的当归补血汤应是一首补气为主的方剂[1,2],此说对理解本方方义颇有参考价值,且与目前临床运用的情况基本一致。
【疑难阐释】
1.对于本方重用黄芪的认识 本方为治血虚发热证之主方,方中当归为养血要药,以补益虚损之阴血,古今医家对此均无疑义,惟为何重用补气之黄芪历来认识不一,概括起来大致有五:其一为“补气生血论”,以吴昆为代表,即有形之血生于无形之气,黄芪大补元气,使阳生阴长,气旺血生;其二为“气血双补论”,以汪昂为代表,认为本证不仅血虚,气亦不足,故用黄芪配伍当归以收气血双补之效;其三为“急固浮阳论”,以张秉成为代表,认为本证乃血虚阳浮所致,故治以黄芪大补肺脾元气固外以挽浮阳;其四为“补脾生血论”,以汪绂为代表,即黄芪乃补脾胃以资气血之源;其五为“走表泄热论”,以陈念祖为代表,认为本证之发热乃血虚热郁皮毛不解之故,故以黄芪质轻而味微甘之品,轻清走表使热从汗而泄。上述分歧意见虽多,然究其产生原因主要有二,一是对本证病机认识的差异,即血虚之证何以会出现发热?二是对于血虚发热之证,应当把治疗重点放在哪一方面?中医理论认为,血与气在生理上相生相依,即所谓“气为血之帅,血为气之母”,“气以生血,血以载气”。一旦阴血匮乏,轻者脏腑经络失于濡养,重者无以载气使阳气无所依附而浮越于外,出现诸如发热口渴,目赤面红等热象,故大凡血虚证之发热,皆为阳气得不到阴血的涵养而浮越于外的表现,且热象的轻重亦反映了阳气浮越的程度。本证原书谓其“证象白虎”,足见其热之重而阳浮之甚,实属阳气去里越外之候,故治疗应重在力挽其浮越之阳气。由此可见,张氏所谓“如果大脱血之后而见此等脉证,不特阴血告匮,而阳气亦欲散亡。斯时也,有形之血不能速生,无形之气所当急固。故以黄芪大补肺脾元气而能固外者为君,盖此时阳气已去里而越表,恐一时固里无及,不得不从卫外以挽留之。”确为中肯之论。况且本方之黄芪即便有补气生血之功,但其用量重达当归的五倍之多,再联系该方的主治证候,则不难看出黄芪重用的主要目的显然在于急固浮越之阳气,而非藉气血相生的关系间接地补充阴血之匮乏。至于补气生血之说虽然亦持之有据,但既为补血之剂,何以反而重用补气之品?即使补气有助于生血,可补气药竞为补血药的五倍之多则有悖于方剂配伍之常法,对于一首补血方而言,似乎有喧宾夺主之嫌?更为重要的是,对于血虚发热之证的治疗亦非从补血立法而能奏效,故吴氏所言未免舍本逐末。综上所述,当归补血汤重用黄芪旨在急固浮阳,而非补气生血[3,4]。证之临床,古今医家运用本方时,对于血虚发热之证基本恪守原方药量比例,而对于一般的血虚证以补气生血为主旨时,则多减黄芪之量而重用补血之品。其余几种观点显然亦与本方主治病机不符。
2.有关本方君药的认识 《方剂学》专著及教材中对于本方君药的论述亦有分歧,或以黄芪为君,或以当归为君。上已述及,若治血虚发热之证,因急则治标之用当以黄芪大补元气,固其浮阳为君;而治一般的血虚证,因黄芪之用意在补气生血,助当归补血之力,故宜以当归为君。
【方论选录】
1.吴昆:“血实则身凉,血虚则身热。或以肌困劳役虚其阴血,则阳独治,故令肌热、目赤、面红、烦渴引饮。此证纯象伤寒家白虎汤之证,但脉大而虚,非大而长,为可辨耳。《内经》所谓脉虚血虚是也。当归味厚,为阴中之阴,故能养血,而黄芪则味甘补气者也。今黄芪多于当归数倍,而曰补血汤者,有形之血不能自生,生于无形之气故也。《内经》曰:阳生阴长,是之谓尔。”(《医方考》卷3)
2.张璐:“气虚则身寒,血虚则身热,故用当归调血为主。然方中反以黄芪五倍当归者,以血之肇始本乎营卫也。每见血虚发热,服发散之药则热转剧,得此则泱然自汗而热除者,以营卫和则热解,热解则水谷之津液,皆化为精血矣。”(《伤寒绪论》卷下)
3.汪昂:“此足太阴、厥阴药也。当归气味俱厚,为阴中之阴,故能滋阴养血。黄芪乃补气之药,何以五倍于当归而又云补血汤乎?盖有形之血,生于无形之气,又有当归为引,则从之而生血矣。经曰阳生阴长,此其义耳。庵曰:病本于劳役,不独伤血,而亦伤气,故以二药兼补之也。”(《医方集解·理血之剂》)
4.汪绂:“此方君以黄芪。黄芪,胃气之主药,胃气盛而后脾血滋,然亦必当归滋之,而后血乃日盛,为之媒也。血生于脾,此方补脾胃以滋之,是为补生血之本。犹四君子为补生气之本,与四物汤之为补肝者,又有不同。”(《医林纂要探源》卷7)
5.陈念祖:“凡轻清之药皆属气分,味甘之药皆能补中。黄芪质轻而味微甘,故略能补益,《神农本草经》以为主治大风,可知其性矣。此方主以当归之益血,倍用黄芪之轻清走表者为导,俾血虚发热,郁于皮毛而不解者,仍从微汗泄之。故症象白虎,不再剂而热即如失也。”(《时方歌括》卷下)
6.唐宗海:“此方以气统血,气行则血行,外充皮肤,则盗汗、身热自除;内摄脾元,则下血、崩漏能止。”(《血证论》卷7)
7.张秉成:“如果大脱血之后而见此等脉证,不特阴血告匮,而阳气亦欲散亡。斯时也,有形之血不能速生,无形之气所当急固。故以黄芪大补肺脾元气而能固外者为君。盖此时阳气已去里而越表,恐一时固里不及,不得不从卫外以挽留之。当归益血和营,二味合之,便能阳生阴长,使伤残之血,亦各归其经以自固耳。非区区补血滋腻之药,所可同日语也。”(《成方便读》卷1)
【评议】本方为治血虚发热之证而设,对其配伍意义诸家见解不一。吴氏所谓阳生阴长,补气生血之论虽然言之有据,但却不免舍本逐末,汪绂补脾生血之论立意与吴氏相类;至于汪昂补气养血之说则有悖治血虚发热之法,陈氏走表泄热之说亦与黄芪之功不合;惟张氏所论之病机、方义最为中肯,令人豁然开朗。
【验案举例】
1.血虚发燥 《正体类要》卷上:一患者,扑伤之后,烦躁面赤,口干作渴,脉洪大,按之如无。余曰:此血虚发燥也。遂以当归补血汤,二剂即止。
2.虚劳发热 《寿世保元》卷4:一人虚劳发热,自汗。诸药不能退其热者,服当归补血汤一剂如神。
按语:二案或因扑伤失血,或因久病成劳,致成血虚发热之证,故予当归补血汤益气养血而愈。
【临床报道】
一、内科疾病
1.白细胞减少症 以本方治疗白细胞减少症患者40例。治疗组20例,用当归补血汤加三棱15g,甘草10g治疗;对照组20例,服用利血生20mg治疗,疗程均为14~21天。结果:治疗组显效8例;有效11例;无效1例;总有效率为95%。对照组显效1例,有效10例,无效9例,总有效率为55%。治疗组疗效明显优于对照组。对照组的无效病例再用本方治疗,仍能提高临床疗效[5]。另15例原因不明白细胞减少症患者,随机分为3组,每组5例。一组为当归补血汤组,一组为当归补血汤加三棱组,一组服蜂乳胶囊、多种维生素作为对照。从治疗日起查末梢血液白细胞计数1次,连续3次,各组自身比较,经统计学处理,当归补血汤组有显著差异(P<0.05),加三棱组有极显著差异(P<0.01),对照组无显著差异(P>0.05)[6]。
2.再生障碍性贫血 将48例慢性再生障碍性贫血患者随机分两组,对照组24例给予康力龙片2mg,每日3次,环孢素A胶囊100mg,每日3次;治疗组24例在对照组基础上服用当归补血汤加味方,均治疗6周。结果治疗组疗效优于对照组[7]。
3.原发性血小板减少性紫癜 本方加血余炭、生甘草、仙鹤草为基本方。气虚者选加党参、白术、黄精;血虚者选加熟地、阿胶、枸杞子;阴虚者选加生地、麦冬、五味子、山萸肉、鳖甲;肾阳虚者选加菟丝子、补骨脂、鹿角胶、巴戟天;胃热盛者选加石膏、知母、川军、川连;血热盛者选加丹皮、赤芍、紫草、羚羊角等。治疗原发性血小板减少性紫癜24例,结果全部获效[8]。应用加味当归补血汤治疗血小板减少性紫癜58例,对照组给予再障生血片,4周为1个疗程。结果显效10例(17.2%),良效28例(48.3%),进步15例(25.8%),无效5例(8.6%)。总有效率91.4%。观察组明显优于对照组,差异非常显著(P<0.01)[9]。
4.慢性肾功能不全 将慢性肾功不全患者,随机分为两组,治疗组52例,对照组32例。两组均给予济脉欣(促红细胞生成素)皮下注射,剂量50μg/kg,每周2次,并常规补充铁剂、维生素、叶酸等。治疗组在上述治疗方案不变的基础上,加服当归补血汤(黄芪100g,当归25g),服用12周。两组患者分别于治疗前后检测血红蛋白(Hb),血细胞比容(HCT)。结果治疗12周后,两组HCT和Hb均显著升高(P<0.05),且治疗组的升高幅度大于对照组(P<0.05)[10]。
5.肾病综合征 采用晨起顿服强的松1mg/(kg·d),并予潘生丁及肝素治疗48肾病综合征患者,治疗组加用当归补血汤(黄芪30g,当归6g),共21天。治疗前后TG、TC、血浆黏度、血小板聚集率、24小时蛋白尿定量均明显下降,有显著性差异(P<0.05或 P<0.01),治疗组与对照组比较TG、TC、血小板聚集率、血浆黏度及24小时尿蛋白定量均明显下降(P<0.05)[11]。
二、妇科疾病
1.子宫发育不良性闭经 本方加莪术、三棱、丹参、月月红治疗子宫发育不良性闭经37例。结果显效23例;有效11例;无效3例;总有效率为91.88%[12]。
2.更年期综合征 以本方加夜交藤、桑叶、胡桃仁、三七为基本方治疗更年期综合征79例,气血双虚型加熟地、白芍;肝肾阴虚型加枸杞子、丹皮;脾肾阳虚型加附子、山药、白术;心肾不交型加丹参、枣仁、黄柏。结果:治愈61例;未愈18例[13]。
3.宫颈癌 在中晚期宫颈癌放疗过程中联用加味当归补血汤口服,能增强免疫功能和造血功能,提高局控率。唐氏将60例初治中晚期宫颈癌住院患者按组间均衡设计分为单纯放疗组(单放组)和放疗联合加味当归补血汤口服组(当归组),每组各30例,进行外周血象、 T细胞亚群及局控率的对比观察。结果①治疗后外周血象、T细胞亚群,当归组与治疗前无明显变化(P>0.05),而单放组下降明显(P<0.05),治疗后两组比较,有非常显著性差异(P<0.01);②单放组局控率(CR)为80.0%,当归组为96.7%,两者差异有统计学意义(P<0.05)[14]。
三、其他
1.老年性皮肤瘙痒 以本方为主治疗老年性皮肤瘙痒症156例。服药7~21剂,瘙痒完全消失,抓痕血痂消退,皮肤润泽,半年未复发者为治愈,共104例;瘙痒基本消失,皮肤尚留少量抓痕,半年瘙痒未加重者为显效,共26例;瘙痒减轻,皮肤有散在抓痕或干燥脱屑者为好转,共20例;治疗前后瘙痒与皮肤改变无明显变化者为无效,共6例,总有效率为96%[15]。
2.牙龈出血 以本方合失笑散加味,治疗顽固性牙龈出血20例,结果治愈16例,好转4例。追踪观察0.5~8年均未复发[16]。
【实验研究】
1.促进造血 用乙酰苯肼造成小鼠、家兔溶血性贫血模型,结果表明,本方具有促进造血,对抗酰苯所致的溶血[17]。克隆刺激因子(CSFs)为体内强烈的造血刺激物,调控骨髓细胞的增殖与分化。有研究表明,当归补血汤能显著促进正常及血虚小鼠脾条件培养液(SCM)和肺条件培养液(LCM)中CSFs的产生。折方研究显示,当归促进,而黄芪显著抑制正常小鼠SCM中CSFs生成。提示当归补血汤的补血作用与其刺激CSFs分泌有关,且系当归的作用所致[18]。当归补血汤煎剂、颗粒剂能通过平衡骨髓微环境中EPO,TPO, GM-CSF的表达;促进骨髓造血细胞从G0/G1期进入G2/M期和S期;促进造血祖细胞增殖,从而提高骨髓抑制小鼠外周血象和骨髓象。其中配方颗粒剂疗效较为突出[19]。建立典型同基因骨髓移植(BMT)小鼠模型,随机分成BMT模型对照组和BMT+当归补血汤组,另取正常小鼠外周血及骨髓做空白对照。分别给以生理盐水、当归补血汤10g/(kg·d)灌胃治疗。于BMT后第1、11、22天观察外周血细胞、骨髓单个核细胞(BMMNC),镜下观察小鼠骨髓切片。结果:BMT+当归补血汤组第11、22天外周血白细胞、红细胞、血小板、 BMMNC水平均显著高于BMT模型对照组(P<0.05或P<0.01),骨髓造血组织学情况也明显好于对照组[20]。以失血与环磷酰胺并用所致气血双虚模型大鼠为研究对象,观察药物对外周血红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、血红蛋白(Hb)及血小板(PLT)水平的影响。结果当归补血汤粗多糖及单味药多糖可显著提高失血与环磷酰胺并用致气血双虚模型大鼠外周血RBC、WBC、Hb及PLT的水平,以当归补血汤粗多糖的作用最好[21]。
2.补气 通过对小白鼠常压耐缺氧实验,大鼠窒息缺氧实验,对缺氧小鼠血液和心、脑组织乳酸含量的影响,对大鼠梗死心肌耗氧量的影响等实验观察,表明当归补血汤能提高机体对氧的利用率,增强耐缺氧能力;延缓心和脑功能障碍的发生及促进供氧后脑电的恢复;降低缺氧动物的心脑组织和血液乳酸含量,减轻代谢性酸中毒,有利于维持其功能活动;能减轻大鼠冠脉结扎后梗死区心肌组织的耗氧量,可能是药物改善了心肌的缺氧状态,减轻了代谢产物积累的结果[22]。另有研究根据6-Keto-PGF1α降低可能是气(阳)虚证的实质之一,而本方能显著增加小鼠6-Keto-PGF1α水平(P<0.01),降低TXB2水平,两者比值较对照组显著提高;并根据阳气虚患者cAMP/cGMP值明显下降,用助阳药治疗后,两者比值有所回升,实验证实当归补血汤能显著提高小鼠心肌cAMP水平(P<0.01),且明显提高cAMP/cGMP比值。由此推断当归补血汤是一首补气为主的方剂[4]。
3.对心血管系统的作用 当归补血汤能增强体外培养的心肌细胞收缩功能。本方原方、当归、黄芪均对缺糖缺氧所致心肌细胞损伤有保护作用,表现为线粒体嵴密集,糖原颗粒丰富,肌浆内可见肌原纤维,并形成肌小节。肌原纤维保护整齐,排列规则,表明心肌细胞收缩功能良好[23]。另通过本方对乳鼠心肌细胞缺糖缺氧性损伤保护作用的研究,并经电子显微镜观察,提示缺糖缺氧能引起乳鼠心肌细胞的超微结构明显改变,而使用当归补血汤后其形态结构特征接近有糖有氧对照组,说明本方对缺糖缺氧性损伤乳鼠心肌细胞有肯定的保护作用[24]。本方水煎浓缩液5~20g/kg十二指肠给药,能显著提高麻醉大鼠收缩压、舒张压和平均压,对心率无明显影响;10g/kg能提高心肌张力-时间指数。小鼠常压耐缺氧实验表明10g/kg可显著延长小鼠生存时间,10~20g/kg可显著延长小鼠断头呼吸动作的持续时间[25]。
将不同浓度当归补血汤超滤膜提取物、表皮生长因子(EGF)和生理盐水(NS)分别通过载体加到孵化7天的鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)上,继续孵化3天,显微镜下观察CAM特异性血管生长情况及血管数目变化。结果当归补血汤超滤膜提取物(0.1~0.3g/L)有明显的促进CAM血管新生作用,与生理盐水组比较有统计学意义(P<0.05),其作用与浓度呈正相关,其中以0.3g/L作用最显著,但与EGF组比较促CAM血管新生作用相对较弱(P<0.05)。当归补血汤超滤膜提取物能够明显促进CAM血管新生,且作用与剂量呈正相关,提示当归补血汤超滤膜提取物在治疗缺血性疾病方面可能与其促进血管新生有关[26]。
4.对免疫系统的作用 研究结果表明当归补血汤可以增强机体红细胞的免疫黏附及清除免疫复合物的能力,增强吞噬细胞的吞噬功能,增强NK细胞的杀伤功能,不同程度地促进T、B淋巴细胞的增殖和相应的免疫功能。上述作用的发生机制可能与其调节基因活性和活性分子作用相关[27]。当归补血汤及其单味药对辐射小鼠脾脏抗体形成细胞释放溶血素量、血清溶菌酶量、ANAE阳性淋巴细胞比率、脚垫迟发超敏反应及RBC-C3b受体花环率均有不同程度的促进或提高作用;RBC-IC(红细胞-免疫复合物)花环形成率,除当归外都有明显增强作用[28]。当归补血汤还有显著促进血虚模型小鼠脾淋巴细胞产生白细胞介素-2(IL-2)的作用(P<0.001);拆方研究证明当归或黄芪均能显著促进血虚脾淋巴细胞产生IL-2(P均<0.001)[29]。
本方有对抗免疫抑制剂的作用,而单味药当归、黄芪的作用明显不及全方[30]。另有通过对NK活性、IL-2活性、巨噬细胞活性、CIC含量、溶菌酶含量共5项免疫指标的测定,分析黄芪在当归补血汤内的量效关系。结果表明,本方内黄芪的用量既不可增,也不可减,而必须以“五倍黄芪归一份”的组方规律才是黄芪的最佳剂量[31]。
采用超滤膜分离技术提取当归补血汤,用双抗体夹心ELISA法检测培养脾淋巴细胞上清液中IL-2和IFN-γ的含量,用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定脾淋巴细胞IL-2和IFN-γ mRNA的表达水平。结果超滤膜提取当归补血汤各剂量组小鼠脾淋巴细胞培养上清液中IL-2和IFN-γ的含量均较模型组增高,大剂量组与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。各剂量组小鼠脾淋巴细胞IL-2和IFN-γ mRNA的表达水平均增高,中剂量组和大剂量组与模型组比较,均有显著性差异(P<0.05)[32]。
5.保肝及抗肝纤维化 采用不同剂量的当归补血汤煎剂灌喂小白鼠,使四氯化碳所致小鼠肝损害明显减轻,坏死面积明显缩小;同时小鼠的肝功能(SGPT)值也明显降低,与四氯化碳模型组比较差异显著(P<0.01)。提示本方对四氯化碳所致小鼠肝损害有明显保护作用,并且在该实验所采用的当归补血汤剂量范围内,这种保肝效应与剂量成正比[33]。
将Wistar雄性大鼠采用四氯化碳皮下注射及高脂低蛋白饮食复合因素诱导复制大鼠肝纤维化模型,结果与正常大鼠比较,模型大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)与天冬氨酸转氨酶(AST)水平、总胆红素(TBil)含量明显升高,白蛋白(Alb)含量明显降低;肝组织脂肪变性与胶原沉积明显,肝组织甘油三酯(TG)与丙二醛(MDA)含量增加,超氧化物歧化酶(SOD)活性降低(均P<0.05)。当归补血汤组大鼠肝组织脂肪变性与胶原病理沉积显著改善;血清ALT、AST水平及TBil含量降低,血清Alb含量升高;肝组织羟脯氨酸(Hyp)、TG与MDA含量降低,SOD活性提高(均P<0.05)。结论是当归补血汤具有良好的抗实验性大鼠肝纤维化作用,其主要作用机制与抗肝脏脂质过氧化损伤有关[34]。黄芪当归5∶1,1∶1,1∶5三种配伍比例的当归补血汤均有良好的抗实验性大鼠肝纤维化作用,但以黄芪当归5∶1的经典配比方剂综合效果较好;其作用机制与抗肝脏脂质过氧化损伤有关[35]。
6.抗自由基损伤 当归补血汤体外给药对小鼠肝匀浆温浴后LPO的生成和小鼠肝匀浆在Fe2+作用下LPO的生成均有明显抑制作用;当归补血汤高、低剂量灌胃给药能明显降低小鼠肝组织LPO含量,此作用与当归液、黄芪液及维生素E的作用无显著性差异。提示当归补血汤可能通过抗氧化作用减少LPO的生成及其对组织细胞的损害而发挥较广泛的药理作用[36]。
7.对化疗的减毒增效 将乳腺癌术后患者随机分为对照组和治疗组,治疗组在化疗同时予以当归补血汤口服,对照组单纯化疗。两组均在化疗前后进行KS评分、血象和T淋巴细胞亚群的比较。结果与对照组相比,治疗组在KS评分、骨髓抑制等方面均优于对照组(P<0.05);治疗组的CD8明显下降(P<0.01),CD4/CD8比值明显上升(P<0.01)。结论是当归补血汤可通过改善乳腺癌术后化疗患者的生活质量,提高免疫功能和减轻化疗的毒副反应起到增效减毒作用[37]。
当归补血汤可提高5-Fu对小鼠肝癌H22的抑瘤率(P<0.01),对抗化疗药物所致脾脏、胸腺萎缩,白细胞(WBC)、血小板(PLT)和骨髓有核细胞减少,降低化疗后H22小鼠脾脏 NO和小肠MDA的含量(P<0.05,P<0.01)。结论当归补血汤对化疗药物5-Fu抗小鼠 H22肝癌具有增效减毒的作用[38]。
8.煎出率研究 采用反向高效液相色谱法,测定黄芪、当归(1∶1,5∶1,10∶1)三种不同配伍比例的合煎及当归单煎液中当归活性成分阿魏酸的煎出率。黄芪、当归按经典比例5∶1配伍时,阿魏酸的煎出率最高[39]。
当归补血汤因其药简力专,配伍及用药比例独具特色,故受到科技工作者的广泛关注,在实验研究方面做了大量的工作。综上所述,本方具有促进造血机能,提高心肌细胞的耐缺氧能力,增强免疫机能,保肝和抗自由基损伤等作用。拆方实验表明在对免疫机能的影响方面全方作用优于各单味药,观察本方的量效关系发现,原书剂量的处方对某些免疫功能的促进作用最为明显。上述结果对于阐明本方的作用机理有重要的意义。但有关本方治疗血虚发热机理的研究报道甚少,今后可尝试在此方面作一些探索,并应通过多指标的观察对其量效关系进行深入研究,从而为临床运用本方提供指导。
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